Κατασκευή DNA
Μια κατασκευή DNA είναι ένα τεχνητά κατασκευασμένο τμήμα νουκλεϊκού οξέος που πρόκειται να "μεταμοσχευθεί" σε έναν ιστό ή ένα κύτταρο-στόχο.
Συχνά περιέχει ένα ένθετο DNA, το οποίο περιέχει τη γονιδιακή αλληλουχία που κωδικοποιεί μια πρωτεΐνη ενδιαφέροντος. Το ένθετο DNA έχει υποκλωνοποιηθεί σε φορέα μοριακής βιολογίας.
Μια κατασκευή DNA μπορεί να εκφράζει πρωτεΐνη άγριου τύπου ή να εμποδίζει την έκφραση ορισμένων γονιδίων εκφράζοντας ανταγωνιστές ή αναστολείς. Μπορεί να εκφράζει μεταλλαγμένες πρωτεΐνες, όπως μεταλλάξεις διαγραφής ή μεταλλάξεις λανθασμένης αλληλουχίας. Ένα κατασκεύασμα DNA χρησιμοποιείται συχνά στη μοριακή βιολογία για να αναλυθούν λεπτομερέστερα μακρομόρια όπως πρωτεΐνες ή RNA.
Φορείς μοριακής βιολογίας
Ένας φορέας μοριακής βιολογίας είναι ένα μόριο DNA που χρησιμοποιείται ως όχημα για τη μεταφορά ξένου γενετικού υλικού σε ένα άλλο κύτταρο.
Οι κυριότεροι τύποι φορέων είναι τα πλασμίδια, οι βακτηριοφάγοι και άλλοι ιοί και τα τεχνητά χρωμοσώματα. Κοινό χαρακτηριστικό όλων των τροποποιημένων φορέων είναι μια προέλευση αντιγραφής, μια θέση πολλαπλής κλωνοποίησης και ένας επιλέξιμος δείκτης.
Ο ίδιος ο φορέας είναι γενικά μια αλληλουχία DNA που αποτελείται από ένα ένθετο (διαγονίδιο) και μια μεγαλύτερη αλληλουχία που χρησιμεύει ως "ραχοκοκαλιά" του φορέα. Η ραχοκοκαλιά θα περιλαμβάνει γονίδια βακτηριακής αντοχής για την ανάπτυξη στα βακτήρια και υποκινητές για την έκφραση στον οργανισμό.
Ο σκοπός ενός φορέα που μεταφέρει γενετική πληροφορία σε ένα άλλο κύτταρο είναι συνήθως η απομόνωση, ο πολλαπλασιασμός ή η έκφραση του ενθέματος στο κύτταρο-στόχο.
Η εισαγωγή ενός φορέα στο κύτταρο-στόχο ονομάζεται συνήθως μετασχηματισμός για βακτηριακά κύτταρα ή διαμόλυνση για ευκαρυωτικά κύτταρα. Η εισαγωγή ενός ιικού φορέα ονομάζεται συχνά μεταγωγή.
Υπάρχουν δύο τύποι ενσωμάτωσης πλασμιδίων σε βακτήρια ξενιστές: Ενώ τα επεισόδια, το χαμηλότερο παράδειγμα, ενσωματώνονται στο χρωμόσωμα του ξενιστή.
Ερωτήσεις και απαντήσεις
Ερ: Τι είναι ένα κατασκεύασμα DNA;
A: Ένα κατασκεύασμα DNA είναι ένα τμήμα νουκλεϊκού οξέος που κατασκευάζεται τεχνητά για να μεταμοσχευθεί σε έναν ιστό ή ένα κύτταρο-στόχο.
Ερ: Τι περιέχει συχνά ένα κατασκεύασμα DNA;
A: Μια κατασκευή DNA περιέχει συχνά ένα ένθετο DNA, το οποίο περιλαμβάνει τη γονιδιακή αλληλουχία για μια πρωτεΐνη ενδιαφέροντος.
Ερ: Τι είναι ένας φορέας μοριακής βιολογίας;
Α: Ένας φορέας μοριακής βιολογίας είναι ένα όχημα που χρησιμοποιείται για τη μεταφορά τμημάτων DNA από ένα κύτταρο σε ένα άλλο.
Ερ: Πώς μπορεί μια κατασκευή DNA να αποτρέψει την έκφραση ορισμένων γονιδίων;
Α: Μια κατασκευή DNA μπορεί να εκφράζει ανταγωνιστές ή αναστολείς που εμποδίζουν την έκφραση ορισμένων γονιδίων.
Ερ: Ποια είδη μεταλλαγμένων πρωτεϊνών μπορεί να εκφράσει ένα κατασκεύασμα DNA;
Α: Ένα κατασκεύασμα DNA μπορεί να εκφράσει μεταλλαγμένες πρωτεΐνες, όπως μεταλλάξεις διαγραφής ή μεταλλάξεις εσφαλμένης αλληλουχίας.
Ερ: Ποιος είναι ο σκοπός της χρήσης μιας κατασκευής DNA στη μοριακή βιολογία;
Α: Ο σκοπός της χρήσης ενός κατασκευάσματος DNA στη μοριακή βιολογία είναι η λεπτομερέστερη ανάλυση μακρομορίων όπως οι πρωτεΐνες ή το RNA.
Ερ: Τι είδους πρωτεΐνες μπορεί να εκφράσει ένα κατασκεύασμα DNA;
Α: Ένα κατασκεύασμα DNA μπορεί να εκφράζει πρωτεΐνες άγριου τύπου, μεταλλαγμένες πρωτεΐνες ή ανταγωνιστές/αναστολείς.
