Η Ισαβέλλα της Καστίλης (22 Απριλίου 1451 - 26 Νοεμβρίου 1504) ήταν βασίλισσα της Καστίλης και της Λεόν. Ήταν κόρη του Ιωάννη Β΄ της Καστίλης και της δεύτερης συζύγου του Ισαβέλλας της Πορτογαλίας.
Ο αδελφός της, Ενρίκε Δ', που ήταν βασιλιάς της Καστίλης, ήθελε να την παντρέψει. Ήθελε να παντρευτεί κάποιον από την Πορτογαλία για να αποκτήσει έναν πολιτικό σύμμαχο. Παντρεύτηκε κρυφά τον Φερδινάνδο Β΄ της Αραγωνίας το 1469 και απέκτησε πέντε παιδιά μαζί του. Το νεότερο ήταν η Αικατερίνη της Αραγωνίας, η οποία παντρεύτηκε τον Ερρίκο Η΄ της Αγγλίας το 1509. Η Ισαβέλλα ήταν η γιαγιά του Κάρλος Α΄ της Ισπανίας (Κάρολος Ε΄, αυτοκράτορας της Αγίας Ρωμαϊκής Αυτοκρατορίας).
Όταν πέθανε ο αδελφός της Ισαβέλλας, υποτίθεται ότι εκείνη θα γινόταν η νέα βασίλισσα. Η κόρη του αδελφού της Ενρίκες, η Χουάνα, ήθελε να γίνει βασίλισσα αντ' αυτού. Μετά από έναν πόλεμο, η Ισαβέλλα έγινε βασίλισσα. Ταυτόχρονα, ο σύζυγος της Ισαβέλλας, ο Φερδινάνδος, έγινε βασιλιάς της Αραγωνίας. Ένωσαν τα εδάφη της Καστίλης και της Αραγωνίας στη σημερινή Ισπανία. Η Ισαβέλλα βοήθησε να πληρωθούν τέσσερα από τα ταξίδια του Χριστόφορου Κολόμβου για να ανακαλύψει την Αμερική. Στην εποχή τους, η Αμερική ονομαζόταν "Νέος Κόσμος". Υπέγραψε ανακωχή το 1492 που έκανε την Ισπανία χριστιανική χώρα. Αφού πέθανε, βασίλισσα έγινε η κόρη της Ιωάννα της Καστίλης.
